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檢測(cè)動(dòng)物身上的油脂

 1、原理。

油脂受到光、熱、空氣中氧的作用，發(fā)生酸敗反應(yīng)，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種，它能與TBA（硫代酸）作用生成粉紅色化合物，在532nm波長(zhǎng)處有吸收高峰，利用此性質(zhì)即能測(cè)出丙二醛含量，從而推導(dǎo)出油脂酸敗的程度。 

2、試劑。

BA水溶液：準(zhǔn)確稱取TBA0.288g溶于水中，并稀釋至100ml（如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100ml），相當(dāng)于0.02mol/L；

 三氯-乙酸混合液：準(zhǔn)確稱取三氯-乙酸（分析純）7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀釋至100ml；

丙二醛標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.315g1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀釋至1000ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛100μg，置于冰箱內(nèi)保存。準(zhǔn)確吸取10ml，稀釋至100ml，此溶液每毫升相當(dāng)于丙二醛10μg，備用。 

3、操作步驟 。

（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

 準(zhǔn)確吸取每相當(dāng)于丙二醛10μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中，加水至總體積5.00ml，加入5.00ml TBA溶液，然后按樣品測(cè)定步驟進(jìn)行，測(cè)得光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（2）樣品測(cè)定：

稱取融化均勻的油脂樣品10g(準(zhǔn)確至0.0002g)，置于100ml有蓋三角瓶?jī)?nèi)，加入50.00ml三氯乙-酸混合液，振搖半小時(shí)（保持油脂融溶狀態(tài)，如冷結(jié)即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖）用雙層濾紙過(guò)濾，除去油脂。濾液重復(fù)用雙層濾紙過(guò)濾一次。 

移取上述濾液5.00ml置于25ml比色管內(nèi)，加入5.00ml TBA溶液，混勻，加塞，置于90℃水浴內(nèi)保溫40min，取出，搖勻，靜置,冷卻1h ，于532nm波長(zhǎng)比色，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線得到微克數(shù)（同時(shí)作空白試驗(yàn)）